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你了解Biolegend流式細胞的分選原理嗎？

發布時間： 2019-10-15　　點擊次數： 1515次

　　Biolegend流式細胞分選的原理：
　　當經熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中，被高壓壓入流動室內。流動室內充滿鞘液，在鞘液的包裹和推動下，細胞被排成單列，以一定速度從流動室噴口噴出。在流動室的噴口上配有一個超高頻的壓電晶體，充電后振動，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷，當液滴流經過帶有幾千伏的偏轉板時，在高壓電場的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，沒有充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實現細胞的分離。
　　Biolegend流式細胞分選，它可根據發射光的熒光強度和波長將發光顆粒亞群分開并可實現單克隆分選，能復雜樣本中的細胞進行鑒定、分類、定量和分離，單次可同時對其中一種到四種特定細胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細胞芯片制備。分選后的細胞能直接用于培養、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等，可進一步進行細胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細胞之間的差異化研究。硬件中樣本細胞丟棄的比例低于5%，保證樣本中目標細胞的高回收率。

　　Biolegend流式細胞的特點：
　　1、少量細胞分選時，流式細胞分選度高（99%以上），速度快。的流式細胞儀的分選速度可達25000個細胞/秒以上，比傳統的分選速度提高了很多倍，需要的工作只需要幾小時就能完成。不過流式細胞儀分離細胞的量還是有一定的限制，一次分離的大合理量約為108個細胞。如果細胞量超過109個，則需要耗費10小時以上，分選后細胞的活力會受到很大的影響。
　　2、可以同時進行多個Marker分選，正選負選同時進行。以前的流式細胞儀只能給液滴充上正電荷或負電荷，因此在電場中只能向左或向右偏轉，即兩路分選。儀器可以給液滴充以不同的電量，從而調整液滴的偏轉角度，實現多路分選。BD的FACSAria流式細胞儀就可以進行四路分選。
　　3、不僅于表面抗原，流式細胞儀可以根據任何能檢測到的發光度或熒光散射度差異來分離細胞。如果能保證流式細胞儀的無菌狀態，那么分選后的細胞還可以進行培養或其他分析。
　　4、如果只是偶爾做幾次細胞分選的話，用流式分選還是比較劃算的，只需要準備樣品和抗體，交納一定的儀器使用費即可，不需要購買配套的設備。

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