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北京華新康信生物科技有限公司代理Dako 品牌。北京華新康信生物科技有限公司是Dako品牌代理商。
蘇木素-伊紅(H&E)染色試劑套裝大量現貨,歡迎選購,合作共贏。
Agilent華新康信
北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學領域,由豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成,主營生物化學試劑,儀器,實驗耗材等。
1廣泛的產品輻射領域,試劑,耗材,儀器等。
2產品種類齊全,北京華新康信與國外諸多生命科學領域合作眾多,
緊跟生命科學的發展,不斷滿足客戶的需求,為各位的科研之路上添磚加瓦!
3 一手貨源,價格優勢明顯
4信譽良好,客戶范圍廣,包括清華、北大、交大、復旦、中山等100多所高校,百泰藥業,康龍化成,藥明康德等企業。
歡迎電話垂詢。
蘇木素-伊紅(H&E)染色試劑套裝
Dako CS700(現為Agilent Technologies旗下產品)是一款?全自動免疫組化染色系統?,專為石蠟包埋組織切片的抗體染色設計,廣泛應用于病理診斷、腫瘤分型與科研分析。其核心優勢在于?標準化、高通量與低人為誤差?,適用于臨床實驗室日均百張以上切片的染色需求。
標準操作流程(SOP)?
步驟操作內容關鍵要點
1. 載片準備?將石蠟切片(3–5 μm厚)貼于防脫載玻片,60°C烘箱中烤片1小時確保組織貼附,避免脫片;切勿使用過厚切片(>5 μm)影響滲透
2. 脫蠟與水化?二甲苯×2(10 min)→ 100%乙醇×2(2 min)→ 95%乙醇(2 min)→ 70%乙醇(2 min)→ 蒸餾水沖洗使用環保脫蠟液可減少毒性;每步需充分浸沒切片,避免殘留石蠟
3. 內源性過氧化物酶封閉?3% H?O?(室溫,10 min)避光操作;若使用含過氧化物酶的組織(如紅細胞豐富樣本),此步不可省略
4. 抗原修復?根據抗體說明書選擇:?高壓熱修復?(EDTA/pH 8.0,120°C,2–3 min)或?酶修復?(蛋白酶K)修復液必須全覆蓋組織;修復后自然冷卻,禁止冷水驟冷導致組織脫落
5. 洗滌?PBS-T(含0.05% Tween-20)×3–5次,每次2 min洗滌不干凈是背景非特異性染色的主因;建議使用自動洗板功能
6. 阻水圈繪制?使用PAP筆在組織周圍畫圈(距邊緣2–3 mm)防止抗體擴散至玻片空白區;確保圈內無氣泡
7. 一抗孵育?滴加適量一抗(50–100 μL),濕盒中37°C孵育1 h 或 4°C過夜避免切片干燥;推薦使用Dako即用型抗體(如EnVision+)以簡化流程
8. 二抗/檢測系統?滴加HRP標記的聚合物檢測系統(如EnVision+),37°C孵育30 min嚴禁混用非Dako品牌試劑,否則影響信號放大效率
9. DAB顯色?DAB顯色液現配現用,孵育5–8 min,流水終止顯色時間需根據組織類型調整;建議鏡下觀察控制顯色強度
10. 復染與脫水?蘇木素復染(10–30 s)→ 鹽酸酒精分化 → 流水返藍 → 梯度乙醇脫水 → 二甲苯透明,蘇木素過深可導致核染過度;返藍步驟可使用EDTA pH 8.0修復液提升對比度
11. 封片?中性樹膠封片,蓋玻片使用?Dako CS704?專用蓋片,避免氣泡;封片后室溫干燥24 h再讀片